...Stoffwechsel / III - FORSCHUNGSZENTRUM JUELICH GMBH

来自 : www.freepatentsonline.com/DE19 发布时间：2021-03-25

1. Verfahren zur mikrobiellen Herstellung von Substan­zen, bei dem in einem diese Substanzen produzieren­den Mikroorganismus durch die Erhöhung der Aktivität eines Glukose oxidierenden Enzymes, glukosehaltige Substrate über einen alternativen Stoffwechselweg umgesetzt werden.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Substanzen hergestellt werden, an deren Synthese das Intermediat Erythrose-4-Phosphat beteiligt ist.

3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Aktivität einer Glukosedehydrogenase in den Mikroorganismus eingebracht und/oder erhöht wird.

4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Aktivität einer Glukosedehydrogenase aus Bacillus megaterium in den Mikroorganismus einge­bracht und/oder erhöht wird.

5. Verfahren nach Anspruch 3 oder 4, dadurch gekennzeichnet, daß die Aktivität der Glukosedehydrogenase IV aus Bacillus megaterium in den Mikroorganismus einge­bracht und/oder erhöht wird.

6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich die Aktivität eines Glukonsäure phos­phorylierenden Enzyms erhöht wird.

7. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß die Aktivität einer Glukonatkinase erhöht wird.

8. Verfahren nach Anspruch 6 oder 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Aktivität einer Glukonatkinase aus Escheri­chia coli erhöht wird.

9. Verfahren nach einem der Ansprüche 3 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich die Aktivität einer Glukonolaktonase, insbesondere eine aus Zymomonas mobilis, erhöht wird.

10. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich die Aktivität eines Transportproteins zur PEP-unabhängigen Aufnahme eines Zuckers erhöht wird.

11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß das Transportprotein ein Facilitator ist.

12. Verfahren nach Anspruch 10 oder 11, dadurch gekennzeichnet, daß der Facilitator das Glukosefacilitator-Protein (Glf) aus Zymomonas mobilis ist.

13. Verfahren nach einem der Ansprüche 3 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß die Aktivität eines Glukose oxidierenden Enzyms oder die Aktivität eines Glukose oxidierenden Enzyms und zusätzlich mindestens eine Aktivität aus Glukon­säure phosphorylierendem Enzym, Glukonolaktonase, Transportprotein zur PEP unabhängigen Zuckeraufnah­me, gesteigert wird,

a) durch Einführung der Gene

b) und/oder durch Erhöhen der Genkopienzahl

c) und/oder durch Erhöhung der Genexpression

d) und/oder durch Erhöhung der endogenen Aktivität der genannten Enzyme

e) und/oder durch Strukturveränderung an den Enzymen

f) und/oder durch Verwendung von deregulierten Enzy­men

g) und/oder durch Einführen von Genen, die für dere­gulierte Enzyme kodieren.